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  • Pregunta: Un bioquímico descubrió y purificó una nueva enzima, generando la siguiente tabla de purificación: Procedimiento Proteína total (mg) Actividad (unidades) Extracto crudo 20.000 4.000.000 Precipitación de (NH4)2SO4 5.000 3.000.000 Precipitación ácida 4.000 1.000.000 Columna de DEAE-celulosa 200 800.000

    Un bioquímico descubrió y purificó una nueva enzima, generando la siguiente tabla de purificación:

    Procedimiento Proteína total (mg) Actividad (unidades)

    Extracto crudo 20.000 4.000.000

    Precipitación de (NH4)2SO4 5.000 3.000.000

    Precipitación ácida 4.000 1.000.000

    Columna de DEAE-celulosa 200 800.000

    Cromatografía de afinidad 50 750 000

    Cromatografía de filtración en gel 45 675 000

    a. A partir de la información proporcionada en la tabla, calcule la actividad específica de la enzima después de cada paso de purificación. (La actividad específica es el número de unidades en cada miligramo de muestra)

    b. ¿Qué paso de purificación es el más efectivo en la purificación de la enzima que da el mayor aumento en la actividad específica?
    C. ¿Cuál de los pasos de purificación es menos efectivo?
    d. ¿Hay alguna indicación de que la enzima después del paso 6 de purificación ya sea pura? ¿Cómo verificaría la pureza de la enzima obtenida en los pasos 5 y 6?

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    Hay 2 pasos para resolver este problema.
    Solución
    Paso 1

    Iniciamos realizando la tabla que describe el problema.

    Procedimiento

    Proteína total (mg)

    Actividad (Unidades)

    Actividad específica (U/mg)

    Extracto crudo

    20000

    4000000

    200

    Precipitación de (NH4)2SO4

    5000

    3000000

    600

    Precipitación ácida

    4000

    1000000

    250

    Columna de DEAE-celulosa

    200

    800000

    4000

    Cromatografía de afinidad

    50

    750000

    15000

    Cromatografía de filtración en gel

    45

    675000

    15000


    a) La actividad específica ( Ae ) es es el núme...

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