Pregunta: La glucosa está marcada con 14C en todos los carbonos. Cada carbono de glucosa tiene la misma radiactividad específica de 1,2 Curie por mol (Ci/mol). Se incuba una décima parte de la glucosa radiactiva en 0,4 litros de tampón a pH fisiológico con 0,2 moles de oxaloacetato y todas las enzimas y coenzimas necesarias para la glucólisis y el ciclo del ácido

La glucosa está marcada con 14C en todos los carbonos. Cada carbono de glucosa tiene la misma radiactividad específica de 1,2 Curie por mol (Ci/mol). Se incuba una décima parte de la glucosa radiactiva en 0,4 litros de tampón a pH fisiológico con 0,2 moles de oxaloacetato y todas las enzimas y coenzimas necesarias para la glucólisis y el ciclo del ácido cítrico. Las reacciones metabólicas proceden de la glucosa inicial a través de una ronda del ciclo del ácido cítrico para todos los carbonos de la glucosa.

1. ¿Cuál es la radiactividad específica total de la glucosa que se usó para este experimento?

2. Cuando aparece el piruvato en la secuencia metabólica, ¿cuál es la radiactividad específica total del piruvato?

3. Se realizan mediciones de 14 CO2 gas. ¿Qué fracción del isótopo 14C, si lo hay, se libera como CO2 antes del ciclo del ácido cítrico?

4. ¿Qué fracción del isótopo 14C, si lo hay, se libera como 14CO2 cuando todas las moléculas del acetil-CoA marcado pasan por la primera vuelta del ciclo del ácido cítrico?

5. Se agrega acetil-CoA adicional sin marcar (sin 14C) para permitir una segunda ronda del ciclo del ácido cítrico para todos los carbonos 14C restantes. Quedan disponibles cantidades suficientes de todos los reactivos, enzimas y coenzimas necesarios. ¿Qué fracción del isótopo 14C original permanece en solución (no liberado como CO2 después de la segunda vuelta completa del ciclo del ácido cítrico?

6. Se agrega acetil-CoA adicional sin marcar (sin 14C) para permitir una tercera ronda del ciclo del ácido cítrico. Quedan disponibles cantidades suficientes de todos los reactivos, enzimas y coenzimas. ¿Qué fracción del isótopo 14C original permanece en solución (no liberado como CO2 después de la tercera vuelta del ciclo del ácido cítrico?

7. Se agrega acetil-CoA adicional sin marcar (sin 14C) para permitir rondas adicionales del ciclo del ácido cítrico. Quedan disponibles cantidades suficientes de todos los reactivos, enzimas y coenzimas necesarios. ¿Qué fracción del isótopo 14C original permanece en solución (no liberado como CO2 después de la sexta vuelta del ciclo del ácido cítrico?