1. ¿Por qué el plásmido pET28a(+) tiene dos orígenes de replicación, mientras que muchos otros plásmidos tienen solo uno? ¿Cuáles son sus funciones en el plásmido en cuestión?
2. ¿Qué características combinadas del plásmido pET28(a) y BL21DE3pLysS los convierten en el sistema de expresión más fuerte?
3. ¿Por qué se considera que E. coli BL21 DE3pLysS, pero no BL21, es bueno para expresar proteínas tóxicas?
4. ¿Por qué no se utiliza lactosa para inducir el operón Lac cuando es el verdadero inductor del operón? En su lugar, utilizamos IPTG.

Question

1. ¿Por qué el plásmido pET28a(+) tiene dos orígenes de replicación, mientras que muchos otros plásmidos tienen solo uno? ¿Cuáles son sus funciones en el plásmido en cuestión?

2. ¿Qué características combinadas del plásmido pET28(a) y BL21DE3pLysS los convierten en el sistema de expresión más fuerte?

3. ¿Por qué se considera que E. coli BL21 DE3pLysS, pero no BL21, es bueno para expresar proteínas tóxicas?

4. ¿Por qué no se utiliza lactosa para inducir el operón Lac cuando es el verdadero inductor del operón? En su lugar, utilizamos IPTG.

Accepted Answer

Diseñamos el plásmido pSAM para cumplir con dos criterios durante nuestros estudios que involucran interacciones proteína-ADN: 1) facilitar la transferencia de secuencias clonadas del vector de expresión comúnmente utilizado pET-28a(+), y 2) proporci

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