Pregunta: 1. Debes preparar una reacción de PCR en un volumen total de 50 µl. Dispones de las siguientes soluciones madre: Taq polimerasa (1 U/µl), dNTP (2 M), cebador directo (50 µM), cebador inverso (50 µM), 25 mM de MgCl2, plantilla de ADN (1 µg/µl) y tampón 10x. Debes preparar una reacción de PCR de 50 µl que contenga las siguientes concentraciones finales (¡todo

1. Debes preparar una reacción de PCR en un volumen total de 50 µl. Dispones de las siguientes soluciones madre: Taq polimerasa (1 U/µl), dNTP (2 M), cebador directo (50 µM), cebador inverso (50 µM), 25 mM de MgCl2, plantilla de ADN (1 µg/µl) y tampón 10x. Debes preparar una reacción de PCR de 50 µl que contenga las siguientes concentraciones finales (¡todo en un solo tubo!).

• 1U de polimerasa Taq; • 200 µM de dNTP; • 200 nM de cebador directo; • 200 nM de cebador inverso; • 2 mM de MgCl2; • 10 pg de plantilla de ADN • Tampón 1x.

P1: Su colega realizó diluciones de la solución madre de dNTP para poder pipetear volúmenes "normales". ¿Cuál es la concentración de esta solución madre de dNTP si le dicen que debe agregar 2 µl en un volumen total de 50 µl para obtener una concentración final de 200 µM?

P2: ¿Cuál es la concentración de la solución madre de trabajo de su cebador directo si planea agregar 2,5 µl de esta solución madre en un volumen total de 50 µl para lograr una concentración final de 200 nM?

P3: ¿Cuánta cantidad del tampón 10x necesitas agregar al tubo?

¿Alguien podría ayudarme con estas preguntas con una explicación detallada, por favor, gracias?